产品货号：
SK056-1
中文名称：
总巯基检测试剂盒(微量法)
英文名称：
产品规格：
100管/48样
发货周期：
1～3天
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生物体内巯基主要包括谷胱甘肽巯基和蛋白质巯基。前者不仅能够修复氧化损伤的蛋白质，而且参与活性氧清除，后者对于维持蛋白质构象具有重要作用。通过测定总巯基含量和GSH含量，能够间接测定蛋白质巯基含量。
巯基基团与5,5’-二硫代-双-硝基苯甲酸（DTNB）反应，生成黄色化合物，在412nm处有最大吸收峰。
| 组分 | 规格 |
| 试剂一 | 18mL |
| 试剂二 | 1mL |
保存：2～8℃，避光，有效期3个月。
天平、研钵、恒温水浴锅、酶标仪、96孔板、乙醇和蒸馏水。
- 组织样本：按照组织质量(g)∶水体积(mL)＝1∶5～10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL蒸馏水）进行冰浴匀浆，然后8000g，4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
- 血清，培养液：稀释5倍后测定，可取0.1mL样本，加入0.4mL蒸馏水，混匀，置冰上待测。
- 酶标仪预热30min，调节波长至412nm。
- 在96孔板中加入如下试剂：
成分(μL) 对照管 测定管 样品 40 40 试剂一 150 150 试剂二 10 乙醇 10 - 混匀，25℃静置10min，测定412nm吸光值。ΔA＝A测定－A对照。每个测定管设一个对照管。
总巯基标准曲线：y＝1.8111x－0.0037，R2 = 1，x为标品浓度，单位μmol/mL，y为吸光度ΔA。
- 组织样本：
- 按样本重量计算：总巯基含量(μmol/g鲜重)＝(ΔA＋0.0037)÷1.8111×V样总÷W=0.552×(ΔA＋0.0037)÷W
- 按样本蛋白浓度计算：总巯基含量(μmol/mg prot)＝(ΔA＋0.0037)÷1.8111×V样总÷Cpr=0.552×(ΔA＋0.0037)÷Cpr
- 按样本重量计算：
- 血清、培养液样本：总巯基含量(μmol/L)＝(ΔA＋0.0037)÷1.8111×5×103＝2761×(ΔA＋0.0037)
- V样总：加入提取液体积，1mL；
- W：样品质量，g；
- Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL；
- 5：血清或培养液等液体样本稀释倍数；
- 103：1mmol/L=103μmol/L
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